眼刺激性の評価には従来、ウサギの眼に被験物質を滴下して、障害の程度を観察する動物実験（ドレイズ試験）によって行われてきました。Vitrigel-Eye Irritancy Test（EIT）法は、動物実験の代替法試験として、追加の試験を実施せずに、UN GHSが定義した眼刺激性（区分の分類は不可*1）または重篤な眼損傷の分類及び表示を必要としない（UN GHS区分外）被験化学物質を同定することができるin vitro試験法です。 角膜の表面にある上皮層は上皮バリア機能を持っておりますが、眼刺激性のある化学物質が眼に触れると、上皮バリアが破壊され、障害が引き起こされます。 上皮バリアの健全性を簡便に評価する方法の、経上皮電気抵抗値（TEER値）を測定することで眼刺激性の判断を行う試験となります。なお、本試験はOECD TG494に準拠して実施します。
ボゾリサーチセンターは本試験の国際バリデーション研究の一員です。（*2*3）
*1：UN GHS区分では区分1、2A、2B,及び区分外（偽陽性）のいずれでもある可能性も含む。
*2：Vitrigel-EIT Validation Management Team (2017)：Validation Study of the Vitrigel-EIT method as an alternative to in vivo eye irritation testing Study Report, Version 2.0
*3：Vitrigel-EIT Validation Management Team (2014)：Study plan for the validation trial on Vitrigel-EIT as alternative to eye irritation testing, Version 4
HCE-T細胞（不死化ヒト角膜上皮細胞）
角膜モデル用培地（製造会社：関東化学株式会社、製品番号：25997-96）
ad-MEDビトリゲル®（製造会社：関東化学株式会社、製品番号：08363-96）
経上皮電気抵抗（TEER）測定装置（製造会社：関東化学株式会社、製品番号：40226-97）
2.5w/v%
陰性対照：生理食塩水
陽性対照：塩化ベンザルコニウム
参照試料：エタノール
＜以下に該当する被験物質は、本試験法から除外する＞
・培養液に2.5%になるよう混合したときのpHが5以下の物質
・2.5%濃度混合直後と3分後の660nmにおける吸光度の差が0.1を超える物質
最低0.5 g（適応範囲確認用＋本試験使用）
被験物質濃度2.5%になるよう培地を添加させた際に、溶解しない場合はボルテックス（1分）、超音波（20分以内）、加温（70℃以下）の順に実施を行い、溶解又は均一に懸濁している際に試験に使用できるものとします。
約2カ月（スクリーニング試験、速報は実験開始から3週間程度）
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